Bazı pestisitlerin karbonik anhidraz izoenzimleri üzerine etkilerinin araştırılması

Abstract

u çalışmada insan eritrositlerinden Karbonik anhidraz izoenzimleri saflaştırıldı ve bazı pestisitlerin bu enzim üzerine inhibisyon etkileri araştırıldı. Enzim Sepharose-4B-4-(6-Amino-hekziloksi)-benzensulfonamit kimyasal yapısına sahip afinite kolonu kullanılarak insan eritrositlerinden saflaştırıldı. İzoenzimlerin saflığı, Sodyum Dodesil Sülfat Poliakrilamit Jel Elektroforezi (SDS-PAGE) ile kontrol edildi. Araştırmamızda kullanılan pestisitlerin hCA-I ve hCA-II izoenzimlerini in vitro olarak farklı düzeylerde inhibe ettiği saptandı. Bu pestisitlerin içerisinde hCA–I enzimi için en güçlü inhibitör Karbofuran (IC50:6,52 µM; Ki:3,58 µM), en zayıf inhibitör ise 1-Naftol (IC50:16,55 µM; Ki:14,4 µM) olduğu tespit edildi. hCA-II için en güçlü inhibitör Koumatetralilin (IC50:5,06 µM; Ki:1,62 µM), en zayıf inhibitör Dimetaklor (IC50 14,6 µM; Ki:8,44 µM) olduğu tespit edildi.The inhibition of carbonic anhydrase isoenzymes on this enzyme was purified and investigated for some of these pesticides. Affinity column with the chemical structure of enzyme Sepharose-4B-4- (6-Amino-hexyloxy) -benzenesulfonamide was purified from human erythrocytes. The purity of the isoenzymes was checked by Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE). The pesticides used in our study were found to inhibit hCA-I and hCA-II isoenzymes at different levels in vitro. Among these pesticides, the strongest inhibitor for the hCA - I enzyme is Carbofuran (IC50: 6.52 µM; Ki: 3.58 µM), the weakest inhibitor is 1-Naphtol (IC50: 16.55 µM; Ki: 14.4 µM) Coumatetralil (IC50: 5.06 µM; Ki: 1.62 µM) was the strongest inhibitor for hCA-II, and Dimethachlor (IC50 14.6 µM; Ki: 8.44 µM) was found to be the weakest inhibitor.