Tümör nekroz faktör α(TNF-α)’nın hipoksik ve normoksik koşullarda hepatoma kanser hücrelerinde (Hep3b) sitotoksik etkisinin belirlenmesi

Abstract

Bu çalışmada Tümör Nekroz Faktör α (TNF-α)’nıninsan hepatoma hücrelerindeki normal (normoksik) ve düşük oksijen (hipoksik) koşullarında sitotoksik etkisi araştırılmıştır. Normal oksijenin yanı sıra, kimyasal indüklenmiş hipoksik koşullarda, TNF-α’nın sitotoksik etkisi 24, 48, 72 saatlerde 50 ve 500 Ü/ml uygulanarak hücrelerde MTT testi ile belirlenmiştir. Sonuçlar istatistiksel olarak analiz edilerek yorumlanmıştır. TNF-α’nın doza ve zamana spesifik sitotoksik etkisi belirlenmiştir. Normal oksijen koşullarında, Hep3B hücre hattında 48 ve 72 saatlerde kontrol grubuna göre herhangi bir etki görülmezken, 24 saatte 50 Ü/ml ve 500 Ü/ml dozlarda proliferasyonda artış görülmüştür. Hipoksik koşullarda da 24 saatte normoksik koşullardaki gibi bir etki gözlenirken, 48 saatte 500 Ü/ml TNF-α uygulanmasında da hücre proliferasyonunda anlamlı artış gözlenmiştir. 72 saatte ise 500 Ü/ml TNF-α uygulaması hücre proliferasyonunda istatistiksel olarak anlamlı azalışa sebep olmuştur.

In the present study, the antitumor effects of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) was investigated in human hepatoma cells, Hep3B under normal oxygen and hypoxic conditions. Cytotoxic effect of two different concentrations, namely 50 U/ml and 500 U/ml, of TNF-α was determined at three time points, 24h, 48h and 72h under normal oxygen and chemically induced hypoxic conditions and followed by MTT test. The results were statistically analyzed by one way ANOVA test. The dose and time-dependent antitumor activity of TNF-α was determined in Hep3B cells. In normoxic conditions, 50 U/ml and 500 U/ml of TNF-α on Hep3B cells exhibited the proliferative effect although no effect was detected at 48 h and 72 h compared to control group. In hypoxic condition, similar to proliferative effect in normoxic conditions, 500 U/ml TNF-α caused the same proliferative effects at 24 h and 48 h. In hypoxic condition, 500 U/ml of TNF-α led to statistically significant cytotoxic effect of Hep3B cells at 72h.