Afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılan karbonik anhidraz (I-II) izoenzimleri üzerine bazı pestisitlerin in vitro etkilerinin araştırılması

Abstract

Bu çalışmanın amacı; çevre ve insan sağlığı için toksisitesi yüksek olan bazı pestisitlerin hidrataz aktivite yöntemi kullanılarak karbonik anhidraz izoenzimleri (hCA I ve II) üzerine etkilerini araştırmaktır. İnsan kan eritrositlerinden Sefaroz-4B-4-(6-Amino-heksilokzi)- benzensülfonamit afinite jeli kullanılarak hCA I ve II izoenzimleri saflaştırıldı. Enzimlerin saflığı; sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi ile kontrol edildi. Ayrıca bazı pestisitlerin hCAI-II izoenzimlerini in vitro ortamda µM düzeylerde inhibe ettiği belirlendi. Bu pestisitlerden hCA-I enzimi için en güçlü inhibitörün Simazin (IC50: 0,366 µM), en zayıf ise Koumatetralil (IC50: 6,41 µM) olduğu belirlendi. hCA-II enzimi için en güçlü inhibitörün Klorpirifos (IC50: 0,527 µM), en zayıf inhibitörün ise Koumatetralil (IC50: 8,74 µM) olduğu belirlendThe aim of this study was to investigate the effects of some pesticides with high toxicity for the environment and human health on carbonic anhydrase isoenzymes (hCA I and II) using hydratase activity method. hCA I-II were purified from human blood erythrocytes using Sepharose-4B-4-(6-Amino-hexyloxy)-benzenesulfonamide affinity gel. In order to determine the purity of the enzymes, sodium dedocyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis was performed. In addition, it was determined that some pesticides inhibited hCAI-II isoenzymes at µM levels in vitro. It was determined that among these pesticides, the strongest inhibitor for the hCA-I enzyme was simazine (IC50: 0.366 µM), and the weakest was coumatetralil (IC50: 6.41 µM). The strongest inhibitor for the hCA- II enzyme was chlorpyrifos (IC50: 0.527 µM), and the weakest inhibitor was coumatetralil (IC50: 8.74 µM)