Laktoperoksidaz enziminin bazı çözücülerle in vitro etkisinin incelenmesi

Abstract

Biyokimyasal reaksiyonları katalizleyen protein yapıdaki maddelere ‘enzim’ denir. Laktoperoksidaz (LPO) enzimi; sütte, tükürkte, gözyaşında, yenidoğanların sindirim sisteminde bulunan; prostetik grup olarak hem grubu içeren tek bir polipeptid zincirinden oluşan glikoproteindir. Çalışmada Sepharose 4B-etilendiamin 4-izotiyosiyonat benzen sulfanomid jeli kullanılarak; sığır sütünden LPO enzimi saflaştırıldı. Enzimin saflık kontrolü SDS-PAGE ile yapıldı. Bazı çözücülerin enzim üzerindeki etkileri incelenerek; inhibisyon gösteren çözücüler için IC50 değerleri, inhibisyon türleri ve inhibisyon sabitleri bulunmuştur. En fazla inhibisyon etki gösteren çözücünün 1,82 μM ile asetofenon olduğu belirlenmiştir. 2-propanol, diklorometan, trietil amin, sodyum silikat, perklorik asit çözücülerinin inhibisyon tipi nonkompetetif olarak saptanmış; inhisbisyon sabitleri sırasıyla 6,7x10-4, 8,10x10-6, 1,17x10-4, 7,51x10-6, 8,11x10-6 bulunmuştur.

Protein substances that catalyze biochemical reactions are called ‘enzymes’. Lactoperoxidase (LPO) enzyme; found in milk, spit, tears, digestive system of newborns; is a glycoprotein consisting of a single polypeptide chain comprising both groups as a prosthetic group. Sepharose 4B-ethylenediamine 4-isothiocyanate benzene sulfanomide gel; LPO enzyme was purified from bovine milk. The purity of the enzyme was checked by SDS-PAGE. By examining the effects of some solvents on the enzyme; IC50 values, inhibition types and inhibition constants were found for the solvents that exhibited inhibition. The most inhibiting solvent was found to be acetophenone with 1.82 μM. The type of inhibition of 2-propanol, dichloromethane, triethyl amine, sodium silicate, perchloric acid solvents was found to be noncompetitive; Inhibition constants were 6,7x10-4, 8,10x10-6, 1,17x10-4, 7,51x10-6, 8,11x10-6 respectively.