Karbazol ß-laktam türevlerinin paraoksonaz enzimi üzerine etkilerinin araştırılması

Abstract

Paraoksonaz (PON1), arilesteraz, paraoksonaz ve laktonaz aktivitesine sahip bir ester hidrolazdır. Detoksifikasyon ve antioksidan aktivitesi ile metabolizmada önemli fizyolojik fonksiyona sahip olan paraoksonaz (PON1) enziminin fizyolojik substratı henüz tanımlanmamıştır. Bu araştırma iki bölümden oluşmaktadır. Birinci bölümde, insan serum paraoksonaz (PON1) enzimi, amonyum sülfat çöktürmesi ve hidrofobik etkileşim kromatografisi (Sepharose 4B-L-tirozin-1-Naftilamin) yöntemleri kullanılarak saflaştırılmıştır. Saflaştırılmış enzim SDS-Poliakrilamid jel elektroforezinde yaklaşık 43 kDa molekül ağırlığında tek bant vermiştir. Araştırmanın ikinci bölümünde ise hidrofobik etkileşim kromatografisi ile saflaştırılan paraoksonaz (PON1) enzimi üzerinde 36 farklı karbazol ß-laktam türevlerinin in vitro etkileri incelenmiştir. Bileşiklerin tamamının enzimi belirli ölçüde aktive ettiği saptanmıştır.

Paraoxonase (PON1) is a ester hydrolase, which has arylesterase, paraoxonase and lactonase activity. Paraoxonase (PON1) enzyme has important physiological function on metabolism by detoxification and antioxidant activity. Its physiological substrate has not been determined yet. This study consist of two parts. In the first chapter, human serum paraoksonaz (PON1) was purified by using ammonium sulfate precipitation and hydrophobic interaction chromatography (Sepharose 4B-L-tyrosine-1-Naftilamin). Purified enzyme was shown a single band with 43 kDa in SDS-polyacyrilamide gel electrophoresis. The second part of the study, the effects of 36 different carbazole ß-lactam derivatives in vitro were investigated on paraoxonase (PON1) enzyme purified with hydrophobic interaction chromatography. It was determined that all of the compounds activate the enzyme activity by different rate.