Bazı flavon türevlerinin enzim katalizli sentezi ve aktivitelerinin araştırılması

Abstract

Bu çalışmada; İlk aşamada bir flavonoid olan kaempferol molekülünün açil türevinin enzim katalizli reaksiyon ile bölge seçimli olarak sentezlenmesi amaçlanmıştır. Reaksiyonda enzim olarak Candida antarctica’dan elde edilen akrilik reçine lipaz (Lipase acrylic resin from Candida antarctica, CAL-A) ve Pseudomonas fluorescens'den elde edilen amano lipaz (Amano Lipase from Pseudomonas fluorescens, PSL), açilleyici ajan olarak da etil asetat ve vinil asetat kullanılmıştır. Elde edilmesi beklenen hedef molekül, 7-asetoksi-3,5-dihidroksi-2-(4´- asetoksifenil) kromen-4-on (B-1) molekülünün yapısı 1H-NMR ve 13C-NMR spektroskopileri kullanılarak incelenmiştir. İkinci aşamada ise kaempferol molekülünün açil türevi, enzim kullanılmadan asetik anhidrit ve piridin kullanılarak sentezlenmiştir. Hedeflenen ve elde edilen 3,5,7-triasetoksi-2-(4´-asetoksifenil) kromen-4-on (B-2) molekülünün yapısı FT-IR, 1H-NMR ve 13C-NMR spektroskopileri kullanılarak aydınlatılmıştır. Üçüncü aşamada ise kaempferol molekülü ve elde edilen açil türevinin enzimatik ve biyolojik aktiviteleri incelenmiştir. Fizyolojik önemleri oldukça yüksek olan ksantin oksidaz (XO) enziminin afinite etkisi ve karbonik anhidraz (CA) enzimine inhibisyon etkisi incelenirken, antioksidan aktivite tayini için, (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) DPPH serbest radikali giderim aktivitesi, lipid peroksidasyonu inhibisyonu aktivitesi (ß-Karoten-Linoleik Asit) ve Cu+2 indirgeme kapasitesi (CUPRAC) yöntemleri kullanılmıştır. Ayrıca bu bileşiklerin asetil kolinesteraz ve bütiril kolinesteraz inhibisyon etkileri (Antikolinesteraz aktivitesi) incelenmiş olup yapılan aktivite çalışmalarında, sentezlenen 3,5,7- triasetoksi-2-(4´-asetoksifenil) kromen-4-on (B-2) bileşiğinin, çıkış maddesi olan kaempferole göre daha düşük aktivite gösterdiği gözlemlenmiştir.

In this study, In the first step, the acyl derivative of kaempferol molecule, a flavonoid, is aimed to be synthesized region-selectively by enzyme-catalyzed method. In the reaction, Lipase acrylic resin from Candida antarctica, (CAL-A) and Amano Lipase from Pseudomonas fluorescens (PSL), were used as enzymes, and ethyl acetate and vinyl acetate were used as acylating agents. The structure of the expected molecule 7-acetoxy-3,5-dihydroxy-2-(4´-acetoxyphenyl) chromen-4- on (B-1) was determined using 1 H-NMR and 13 C-NMR spectroscopy. In the second step, the acyl derivative of the kaempferol was synthesized with by using acetic anhydride and pyridine without using the enzyme. The structure of targeted and gained molecule; 3,5,7-triacetoxy-2-(4´-acetoxyphenyl) chromen-4-on (B-2) was identified by FT-IR, 1H-NMR and 13C-NMR spectroscopy. In the third step, the enzymatic and biological activities of the kaempferol molecule and the obtained acyl derivative were investigated. When the affinity effect of xanthine oxidase (XO) enzyme and the inhibition effect of carbonic anhydrase (CA) enzyme which have high physiological importance are investigated, for antioxidant activity three methods were used: DPPH (2,2- diphenyl-1-picrylhydrazyl) free radical scavenging activity, lipid peroxidation inhibition activity (ß-carotene-linoleic acid method) and Cu+2 reduction capacity (CUPRAC) methods. In addition, acetylcolinesterase and butyrylcolinesterase inhibition activitiy (Anticholinesterase activity) of these molecules were investigated. Activity studies had showed that the synthesized 3,5,7-triacetoxy-2- (4'-acetoxyphenyl) chromen-4-one (B-2) has weaker activity then kaempferol.